利用发酵，收集酵母菌体，用去离子水清洗三次，然后用含有不同金属离子和冻干保护剂的磷酸盐缓冲液重悬(50 mmol/L，pH 8.0)，在经过预处理后，通过冻干机真空冷冻干燥可得到展示 RML 的毕赤酵母全细胞粉。

    冻干机真空冷冻干燥前在菌悬液中添加一些保护剂，如山梨醇、蔗糖、果糖、海藻糖、葡萄糖、聚乙二醇、甘油等，能提高其活性和稳定性。这些物质在冻干过程中其羟基可与蛋白质中的极性基团形成氢键，代替蛋白质极性基团周围的水分子，使蛋白质表面形成一层假定的水化膜，保护氢键的连接位置不直接暴露在周围环境中，稳定蛋白质的高级结构，防止其因冻干而变性。

    因此而知海藻糖、果糖和山梨醇等物质在冻干过程中能减少酶蛋白的变性，从而提高该酶的合成活力。与未处理的全细胞酶粉相比，冻干中加入这三种物质后，合成活力分别提高 17%、20.29%和 20.72%。

文章原创:上海拓纷机械设备有限公司 冻干机 www.toffon.cn  冷冻干燥机：www.tuffun.cn